上个月一个高校实验室的老师来找我,说他买的 CO₂摇床,养的细胞状态一直不对。换了试剂、换了操作人、换了培养瓶,还是不对。细胞长势忽快忽慢,pH 值也不稳定。
我让他把机器后盖打开拍个照片。照片发过来,我一看传感器型号就明白了。他那台机器用的是热导式 CO₂传感器,不是 NDIR 红外传感器。
他跟我说,当初买的时候销售跟他讲 "CO₂精度 ±0.1%",他觉得够用。我说你这个 ±0.1% 是空载、关门、恒温恒湿条件下测出来的,你实际用的时候要开门取样,里面还有培养皿蒸发的水汽,这个精度不作数。
今天把 CO₂细胞培养摇床的浓度控制这件事讲透。传感器怎么选、气路怎么验、校准怎么做,全是拆机器拆出来的经验。
两种传感器,差别到底在哪
我拆过十几台不同价位的 CO₂摇床,传感器就两类:热导式和 NDIR 红外。
热导式传感器,原理是测气体导热率变化来推算 CO₂浓度。结构简单,成本低,一颗传感器几十块钱。但是有个致命毛病 —— 对温度和湿度特别敏感。你腔体里湿度大一点,温度波动一点,它读数就飘。用个两三年,传感器漂移得能差出 1%。
做微生物摇床无所谓,菌对 CO₂浓度不敏感。做细胞培养,这个精度扛不住。细胞培养要求 CO₂稳定在 5%,偏差超过 0.3%,培养液 pH 值就变,细胞状态就不对。
NDIR 红外传感器,是靠红外光吸收来测 CO₂,不受温湿度影响,稳定,寿命长。但是成本高,一颗进口传感器大几百到上千,国产的也要两三百。便宜的机器为了压价,用热导式给你糊弄上去,你外行根本看不出来。
怎么区分?你问销售一句:"传感器是 NDIR 红外的还是热导式的?" 他答不上来,或者跟你讲 "我们传感器精度很高" 这种废话,你就知道他自己都不懂。你再让他把传感器型号写在合同里,他不敢写,那就是热导式。
做个测试,两分钟验出来
我让那个老师做个测试。买一瓶标准 CO₂气体,浓度 5% 的,带证书,大概 300 到 500 块钱。接个流量计,通到腔体里。
他那台通了十分钟,显示屏显示 4.8%,实际通进去的是 5%,差 0.2%。再通一小时,慢慢爬到 5.1%。这就是热导式传感器的漂移 —— 刚开始读数偏低,时间长了慢慢飘上去。
好的 NDIR 机器,通标气进去,两分钟内显示屏稳定在 4.95% 到 5.05% 之间,不再动。这个精度做细胞培养才靠谱。
你买 CO₂摇床的时候,让供应商现场给你做这个测试。带一瓶标气过去,或者让他准备。不敢做的,你心里有数。
气路泄漏,是第二个大坑
CO₂进气阀,好机器用的是高精度电磁阀,响应快,开关次数几十万次不泄漏。便宜机器用普通阀,用久了密封不严,CO₂一直往腔体里漏。你设定 5%,实际跑到 6%,细胞在里面被高浓度 CO₂泡着。
怎么验?很简单。设定 5%,机器稳定后,把 CO₂气瓶关了,看显示屏数值变化速度。
如果关瓶后数值十分钟内开始往下掉,说明气路有泄漏,阀的密封不行。泄漏的机器,你 CO₂气体用得特别快,一瓶气正常用两三个月,泄漏的机器一个月就用完了。你算算 CO₂气体多少钱一瓶,一年多花多少气钱。
如果半小时还稳稳压在 5%,说明阀是好的。
再教你一招。关瓶之后,用肥皂水喷在气路接头处,看有没有冒泡。冒泡就是漏。这个办法土,但有效。
校准怎么做,周期多长
药厂 QA 一般要求 CO₂摇床每季度校准一次。高校实验室宽松一点,半年一次。
校准用什么气?一定要用有证书的标准气体,浓度选你常用的那个点,一般是 5%。证书上有不确定度,一般在 ±2% 以内。你自己买一瓶,放实验室,每次校准时接上去,跟显示屏对。
偏差超过 0.2%,就要调整。调整要找工程师,别自己拧旋钮,拧乱了更麻烦。
你还要注意一个事:传感器是有寿命的。NDIR 传感器寿命一般 5 到 8 年,热导式的 3 到 5 年。到期了要换,不是校准能解决的。你问供应商换传感器多少钱,好机器换一颗 NDIR 传感器 1000 到 2000,差机器换热导式的几百块,但你两年换一次,加起来也不便宜。
说几个行业里心照不宣的事
第一个,销售跟你说 "我们 CO₂精度 ±0.1%",你问他这个数据是在什么条件下测的。空载、关门、恒温恒湿,测出来当然好看。你实际用的时候要开门取样,里面还有培养皿蒸发的水汽,他那个数据不作数。他不会告诉你测试条件。正确做法是让他把测试条件写在技术协议里,不写你就当他是吹的。
第二个,校准气体你自己买,别用厂家配的。厂家配的那瓶标气,浓度准不准、过期没过期,你没法查。自己去气体公司买一瓶有证书的,300 到 500 块钱,每次校准都用它。你会发现很多机器拿标气一通,读数根本不对。厂家给你校准的时候,你盯着他测,别让他拿个手机读数糊弄你。
第三个,CO₂摇床这个品类,国产和进口的差距这几年主要就在传感器和阀上。很多客户一开始冲着便宜买了热导式的,细胞养不好,折腾半年,最后还是换了 NDIR 的。算下来,便宜机器省的那两万块钱,不够赔一批细胞的。做细胞的人都知道,一批细胞值多少钱,你自己算。
上海赫田做 CO₂细胞培养摇床,标配 NDIR 红外传感器,气路用对标进口品牌的电磁阀方案。不是为了卖贵,是知道做细胞的客户经不起折腾。这几年做进口平替,不少药厂和科研单位对比完进口品牌和我们的参数,选了国产高标准方案。传感器这一关过不去,别的都白说。